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一起支气管镜相关假暴发调查

发布日期:2019-01-17来源:J Hosp Infect发布人:陈小晓

文献检索: 周密       翻译:胡潇云     

审校:徐子琴  罗万军

编者按

非结核分枝杆菌是普遍存在于环境中的微生物,被认为是条件致病菌,可导致河北福彩网和暴发,由非结核分枝杆菌引发的暴发事件屡有发生,经调查,很多案例显示这些暴发与用2%戊二醛溶液对手术器械进行灭菌有关,同时研究也发现分离出的菌株对戊二醛有抗性,且医疗机构存在不合理的灭菌方法,导致该菌株在河北福彩环境中生长。作为控制措施,很多国家都严令禁止采取化学浸泡进行手术器械的灭菌本研究通过对圣保罗一些河北福彩进行了分枝杆菌的鉴定,发现某家河北福彩可能存在分枝杆菌的暴发。我们一起来看看这起因支气管镜导致的河北福彩网假暴发事件吧!


由脓肿分枝杆菌亚型——马赛分枝杆菌播散引起的支气管镜相关河北福彩网假暴发



摘要

圣保罗州的阿道夫·卢茨研究所为许多医疗机构进行分枝杆菌的鉴定,在2008年鉴定了一次在同一家医疗机构接受支气管镜检查的患者中发生的疑似暴发。本研究目的是分析脓肿分枝杆菌克隆株亚型。从28名患者、一份支气管镜检查用水和4台全自动内镜清洗机中分离出PFGE表型高度相似的马赛分枝杆菌。供水中没有发现这株细菌,可能是感染患者污染了支气管镜,之后的患者假阳性标本进一步增加。


方法

当有3名接受了支气管镜检查的患者在同期培养检出脓肿分枝杆菌bolletii 亚种时,怀疑发生了暴发事件


河北福彩调查

病例定义为在2008年至2009年期间经支气管肺泡灌洗(BAL)培养出分枝杆菌的患者。通过实验室结果和记录追踪病例。


这家教学河北福彩的内镜中心为圣保罗州西北部地区102个城市的200万居民服务。平均每月有53000人就诊,每月进行约1120次内窥镜检查和80次支气管镜检查。在研究期间,支气管镜同时为门诊患者和住院患者进行检查,该内镜中心有4条支气管镜,制造厂商每隔40天对镜子进行维护。消毒过程采取高水平消毒,首先用加酶液进行手工初洗,然后用2%戊二醛浸泡30分钟进行消毒,这个过程由一个受过训练的专业人员完成。


环境卫生学调查

根据研究结果,我们采集了四个支气管镜的冲洗水、80台次内窥镜自动处理机的水样及其供水。将样品处理并接种到罗氏培养基上。所有培养出的分枝杆菌均鉴定到种属。


菌种鉴定

在2008年至2010年间,菌株从28名患者和8份水样中分离出来并送往IAL鉴定。用PRA-hsp65法鉴定菌株,用rpoB基因测序进行种属鉴定。用BLAST工具进行序列分析(http://..ncbi.nlm.nih.gov)以确定菌株和以下菌种的相似性:M.absces.ATCC 19977(JF346872)、M.bolletii CIP 108541(AY859692.1)和M.massiliense CIP 108297(JX041985.1)。每个分离株的菌种鉴定报告代表与指示参考菌株相似性最高的得分。


分子分型

采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术进行分离。用相似系数进行数据分析,通过Dice相关与2%的容忍系数进行Bio.ics(7.5版;应用数学,比利时)相似系数计算。


河北福彩监测和干预措施

确诊病例后,第一种干预措施是根据ANVISA决议用0.2%过氧乙酸代替戊二醛溶液,审查所有外科器械清洗和消毒的每一个步骤,培训整个护理团队关于过氧乙酸的使用和保存方法,以及器械消毒和打包方法。此外,还对内镜和支气管镜的制备和消毒手册进行了检查。更换了水管,在水进入内窥镜自动处理机之前添加5-0.2μm的水过滤器。重新留取水样以确定新的水样未检出分枝杆菌。所有病例均与流行病学监测中心合作进行调查和随访,其中两名患者接受了分枝杆菌感染的治疗。


结果

确定了28个符合病例定义的病例。最后一例是在2009年12月发现的。患者接受支气管镜以检查肺部感染或肺肿瘤。其中2例接受了分枝杆菌感染的治疗,5例死于肺部肿瘤的并发症,其余21例无症状。


经PRA-hsp65鉴定,24株为II型脓肿分枝杆菌,3株为偶发分枝杆菌,1株为I型脓肿分枝杆菌。从收集的15份水样中,8份为分枝杆菌阳性。其中三株被鉴定为M..eticum/M.canaria,这三株菌中有两株是从供水中采集的,一株是从内窥镜自动处理机中采集的。水样中其余5株被鉴定为II型脓肿分枝杆菌,其中4株从自动内窥镜后处理机中采集,1株从支气管镜中采集。


经rpoB测序鉴定,所有II型脓肿分枝杆菌均为脓肿分枝杆菌亚种。所有被分离出的马赛(M. cosmeticum/ M. canariasense)都被鉴定为M. rhodesiae / M. alvei,所有的偶发分枝杆菌都被鉴定为偶发分枝杆菌型,脓肿分枝杆菌I型被鉴定为脓肿分枝杆菌亚型,此外,与基因库中保存的序列进行比较,发现患者和水样中检出的菌株均为脓肿分枝杆菌亚型,马赛分枝杆菌与巴西暴发中检出的CRM273菌株相似性达99%。脓肿分枝杆菌亚型与2005年发生在帕拉州暴发中检出的CIP10453菌株相似性达98%。


仅对脓肿分枝杆菌亚型进行了分子分型。在患者中检出马赛分枝杆菌18株,在水样中检出5株。其余的菌株虽应用了硫脲,但仍因DNA降解未进行分子分型。根据相似性指数将菌株进行比较,并将其分成MAB1,MAB2和MAB3三组(图1)。根据Tenover等(1995年)的标准,这几组的相似性约85%,可能与属于同一克隆株,并与巴西暴发中检出的BRA100克隆株相似。


此外,通过分析收集的菌株数据,可观察到这些在指定时间内收集的菌株情况类似(图2),且与从自动内镜处理机和支气管镜中水样分离出的菌株相同。



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图1. 用Bio.icsv7.5经DraI限制性内切酶酶切后的PFGE图谱分析


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图2. 从患者、内镜和内镜消毒机中分离出非结核分枝杆菌的分布图。黄色:从患者和内镜中分离出的相似菌株;蓝色:患者和内镜消毒机中分离出的相似菌株;红色:其它不同菌株


此次只有2位患者接受治疗,其他无相关感染,属于假暴发,考虑供应内镜处理机的供水系统污染,导致与内镜自动处理机污染和支气管镜污染有关。


原文来源:

Fernandes Garcia de Carvalho N, Rodrigues Mestrinari AC, Brand?o A,et al. Hospital bronchoscopy-related pseudo-outbreak caused by a circulating Mycobacterium abscessus subsp.massiliense. J Hosp Infect. 2018 Nov;100(3):e138-e141.